抗体如同一把“钥匙”,能够识别并结合特定的目标分子,在科研、诊断、药物开发中不可或缺。就像钥匙与锁孔的精密匹配,我们也在不断改进抗体的亲和力和特异性。纳米级亲和力与单表位特异性是第4代抗体药物的核心优势。
兔单克隆抗体的亲和力是鼠单克隆抗体的10-100倍,识别表位更多。义翘神州依托噬菌体展示、单B细胞流式分选和Beacon®三大技术,自主搭建了兔单抗开发平台,可提供从抗原设计、免疫到抗体纯化的一站式兔单抗制备服务,助力您获得目标应用的优质抗体。
01兔单抗:为何更受欢迎?与其他物种(如小鼠、大鼠、鸡等)相比,兔有着独特的免疫应答机制,B细胞反应库是小鼠的50-100倍,意味着兔子可以产生更加多样的抗体,在鉴定表位变异、突变和构象变化等细微差别方面更具优势。
兔单抗具有以下优势:
①亲和力
高兔单抗对目标蛋白的亲和力一般是鼠单抗的10-100倍,甚至可以达到皮摩尔级别。兔抗能够识别小鼠中不具有免疫原性的抗原。
②特异性高
对表位的特定结构具有较高的灵敏度。比如在免疫组化实验中,兔单抗比鼠单抗的图像更清晰、背景干扰更低。在一些诊断试剂中,兔单抗能够检测出鼠单抗检测不到的弱阳性。
③免疫反应强
兔子能够触发更强烈的免疫反应,适用于小分子化合物抗原或半抗原。
④稳定性高
兔IgG没有其他亚型,抗体结构更稳定,适合长期保存和应用。
⑤半衰期长
与鼠单抗相比,兔单抗具有较长的半衰期和较低的免疫原性。
兔单抗在诊断试剂开发领域“得天独厚”。兔单抗的单表位识别精度,可使其识别仅有1个氨基酸差异的抗原,而鼠单抗一般需要5-6个的氨基酸差异才能识别。兔单抗可用于KRAS突变体(G12D vs. G12V)、EGFR磷酸化位点的检测,在检测低丰度蛋白、翻译后修饰靶点时灵敏度更高。
02兔单抗之噬菌体展示技术噬菌体展示技术利用基因工程将抗体基因连接到噬菌体中,并以融合蛋白的形式展示在其表面。通过与靶蛋白的结合完成抗体筛选。噬菌体展示技术包括噬菌体展示抗体库构建、淘洗、单克隆鉴定和阳性克隆重组表达等步骤。义翘神州利用灵活的筛选策略、多种筛选方法以及上清介入检测,筛选的成功率达到90%。
单B细胞抗体制备技术是一类快速制备单克隆抗体的技术。单个B细胞只含有一个功能性重链和轻链可变区DNA序列,即只产生一种特异性抗体。利用这一特性,从免疫动物组织或外周血中分离抗原特异性B细胞,通过单细胞PCR技术扩增IgG重链和轻链可变区基因,再通过哺乳动物细胞表达获得具有生物活性的单抗。
义翘神州单B细胞流式分选后的细胞有两种处理方式:一是直接裂解细胞进行扩增,大限度的得到阳性克隆;二是将分选好的单细胞先在体外培养扩增,再挑选阳性细胞克隆扩增抗体可变区基因,后进行抗体的重组表达和验证。义翘神州单B细胞流式分选技术可完成10板抗原特异性B细胞分选(1000个),10-12天完成单B细胞培养。
义翘神州单B细胞流式分选技术的优势
04兔单抗之单B细胞Beacon®筛选平台
Beacon®单细胞光导系统结合光电定位技术与微流控设计,在一张芯片上完成单细胞挑选和检测,还可根据实验时特定的结果导出目的细胞,更好的保留B细胞多样性。在抗体发现早期阶段获得高质量的阳性hits,避免“克隆”的丢失。
义翘神州单B细胞Beacon®平台,自动筛选上万个浆细胞,将传统杂交瘤技术需要1-2个月的筛选工作,缩短至仅需1天完成,并在1天内可完成5项细胞功能检测。整个筛选过程对细胞无损伤,大程度保证细胞的活性。
利用单B细胞Beacon®平台筛选TNFR2成药性抗体结果显示,克隆M0166的结合活性和竞争活性均高于对照抗体。
05义翘神州兔单抗技术服务
义翘神州依托于噬菌体展示、单B细胞流式分选和Beacon®三大技术,自主搭建的兔单抗开发平台,提供从抗原设计、免疫到抗体纯化的一站式兔单克隆抗体制备服务。兔单抗服务经验丰富,已完成500多项CRO服务,成功率高于90%,单B细胞阳性率高于行业平均水平30-50%。义翘神州兔单抗服务可以直接获得抗体序列,便于后续工程化改造,还提供ELISA、IHC、FACS、IF、WB、IP、Cell assay等多种抗体鉴定服务。
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